Enzyme Kinetics хэмжилт
Нэлээд хэсэг нь фермент бол үүсэх урвалын идэвхжилийн энергийн хэмжээг бууруулдаг катализаторын үүрэг гүйцэтгэдэг уургууд юм. Идэвхжүүлэх энерги нь термодинамикийн хувьд боломжтой бол олон хариу үйлдэл маш хурдан (эсвэл огт тохиолддог) тохиолддог тул хариу үйлдэл хийхэд шаардагдах энерги юм.
Ферментүүд тухайн талбайд тодорхой урвалыг (идэвхтэй газар гэж нэрлэдэг) урвалаар катализаторыг үйлдвэрлэж, урвалд ордог. Дэд бүтцүүд нь зөвхөн тэдгээрийн хувьд тусгай сайтуудтай байдаг. Иймээс өөр бодисууд нь хоорондоо холбогддоггүй. Түлхүүр болон түлхүүрийн нэгэн адил фермент нь зөвхөн нэг онцгой хариу урвалыг (зарим үл хамаарах зүйлүүдтэй) салгах болно.
Тусгай үйл ажиллагаа нь уургийн тусгаарлах аргуудад хэрэглэгддэг бөгөөд цэвэршүүлэх хувийг илэрхийлдэг. Энэ ферментийг худалдан авахдаа энэ нэгжийг мэдэх нь таны цэвэр ферментийг хэр зэрэг тодорхой болохыг зааж өгөх нь чухал юм.
Ферментийн кинетикийг хэмжихдээ (физиологийн эсвэл гадаргуутай ферментийг урвалын түвшин), тодорхой үйл ажиллагааг ферментийн хувиргагч (кальцийн урвал), ферментийн бэлдмэнд нэг мг уургийн нэгжийн нэгж гэж тодорхойлдог.
Тодорхой үйл ажиллагааны жишээ нь:
- Тусгаарлагдсан ферментийн тодорхой үйл ажиллагааг цэвэршүүлэхээс өмнө 150 моль / мин / мг уураг, 800 моль / мин / мг цэвэршүүлсний дараа хэмжсэн.
Тусгай үйл ажиллагаа нь ферментийн цэвэршилтийн чухал хэмжүүр юм. Цэвэр ферментийн өөр өөр хэсгүүд нь ижил утгатай байх ёстой бөгөөд ферментийн уусмалыг шингэлэх хүртэл олон удаа тусгай үйл ажиллагаа явуулах болно. Энэ нь тодорхой үйл ажиллагааг тооцоолохдоо тоон үзүүлэлт (нэгж / мл) ба хуваарь (мг / мл) тэнцүү байна.
Тусгай үйл ажиллагаа нь үйл ажиллагаанаас маш ялгаатай боловч тодорхой үйл ажиллагааны тооцоо нь үйл ажиллагааны үнэ цэнээс хамааралтай хэвээр байна. Энэ нь тодорхойлсон тусгай үйл ажиллагааны утга нь ферментийн нэгжийн тодорхойлолтоос хамаарна гэсэн үг юм.
Хүлээгдэж буй тодорхой үйл ажиллагааны утгаас бага ферментийн багцууд нь өөрчлөгдөж, хольцтой холилдсон ферментийн молекултай байж болно.
Enzyme үйл ажиллагаанд нөлөөлж буй хүчин зүйл
Өөр өөр лабораторид хэмжигдэх үед нэг фермент өөр өөр хэмжсэн үйл ажиллагааны утгатай байж болох юм (өөрөөр хэлбэл, хэмжсэн үйл ажиллагаанд бодит ялгаа, өөр өөр нэгжийн тодорхойлолтыг ашигласнаас үүсэх тодорхой бус зөрүүнүүд байж болно) байж болно.
Туршилтын арга (ферментийн цэвэршилтийг тодорхойлох сорилын арга) нь тайлагнасан үйл ажиллагааны утгуудад нөлөөлнө. Жишээлбэл, энзим нь 20 градусын температуртай харьцуулахад 37 градусын температуртай харьцуулахад илүү идэвхтэй байдаг тул хэрэв шинжилгээгээр 21 градусын хэмд явбал температур нь 32 градусын температурт явуулсан туршилтаас ялгаатай болно. , хэмжилтийг Цельсийн 20-37 градусын температурт явуулдаг).
Иймээс ферментийн нэгжийн тодорхойлолтыг 1 нэгжээр (U) илэрхийлсэн нь илүү сайн стандарт нөхцөлд 1 минутын минут тутамд 1 нмолины субстратын урвалыг салгах ферментүүдийн хэмжээ юм.