Ген болон клонинг ашиглан ямар векторууд хийдэг вэ
Молекул клонд хийхдээ вектор нь гадаад генийг өөр эс рүү шилжүүлэх буюу оруулах үүрэгтэй ДНХ-ийн молекул юм. Үүнийг хувилан олшруулж эсвэл илэрхийлдэг. Векторууд нь генийн клинингийн чухал хэрэгслүүдийн нэг бөгөөд тэдгээр нь биологийн үнэлгээнд хэмжигдэх биохимераторын молекул кодчилдог зарим кодчилогч кодчилдог бөгөөд эдгээр нь организмд оруулах, илэрхийлэхэд нь тусалдаг.
Тухайлбал, клонжуулах вектор нь клирингийн зорилгоор гадаад ДНХ-ийн фрагментийг оруулахын тулд вирус, плазмид буюу эсүүд (өндөр организмууд) -аас авсан ДНХ юм. Клоны векторыг организмд тогтвортой байлгаж чаддаг тул вектор нь ДНХ-ийг хялбархан оруулах эсвэл зайлуулах боломжуудыг агуулсан байдаг. КлИоны фрагментийг клононд хийсний дараа ДНХ-ийн фрагментийг илүү өвөрмөцөөр ашиглах боломжтой өөр вектор руу хуулж болно.
Зарим тохиолдолд вирусыг нянгаар халдварлахад хэрэглэдэг. Эдгээр вирусууд нь богино бактериас буюу фейс гэж нэрлэдэг. Ретровирус нь генийг амьтны эсүүдэд нэвтрүүлэхэд маш сайн вектор юм. ДНХ нь плазмидууд бөгөөд гадны ДНХ-ийг нянгийн эсүүдэд нэвтрүүлэхэд ашигладаг хамгийн түгээмэл векторууд юм. Тэд плазмидын ДНХ-г илрүүлэхэд хэрэглэдэг антибиотик эсэргүүцлийн генүүд, антибиотикийн перри хавтангууд дээр ажилладаг.
Ургамлын эсүүдэд ген шилжүүлэх нь хөрсний бактери Agrobacterium tumefaciens хөрсний бактериар үйлчилдэг бөгөөд энэ нь вектороор үйлчилдэг ба том плазмидийг эзэн эсэд оруулдаг. Зөвхөн антибиотик байгаа үед клонинг вектор агуулсан эсүүд өснө.
Cloning Vector-ийн гол төрлүүд
Зургаан үндсэн хэлбэрүүд нь:
- Plasmid. Бактерийн эс доторх бие даасан хуулбарласан экстротромомаль ДНХ. Плазмид нь ихэвчлэн өндөр хувилбарын дугаартай. Жишээ нь pUC19 нь 500 эс700 ширхэгийн хуулбартай.
- Phage. Шугаман ДНХ-ийн молекулууд бактериопагын lambda-ээс гаралтай. Гадаад амьдралын ДНХ-ээр солигдож болно.
- Cosmids. Плазомосомын ДНХ-ийн молекулууд нь плазмид ба фений шинж чанарыг хослуулдаг.
- Нянгийн эсрэг хиймэл хромосомууд. Бактерийн мини-F плазмидын үндэс дээр үндэслэсэн.
- Дрезийн хиймэл хромосомууд. Энэ нь хиймэл хромосом (эсийн хэлтсийн үеэр хромосомын төгсгөлд нэг удаагийн тусгаарлаалдаг) хиймэл хромосом юм. Энэ нь эсийн хуваагдал, мөөгөнцрийн хроматомер (хроматид, деадыг холбосон хромосомын хэсэг) ба сонгомол маркер мөөгөнцрийн эсийг тодорхойлох.
Хүний хиймэл хромосом. Энэ төрлийн вектор нь генийн нийлүүлэлтэнд хүний эсэд нөлөөлөх боломжтой бөгөөд экспресс судлах хэрэгсэл, хүний хромосомын үйл ажиллагааг тодорхойлох хэрэгсэл юм. Энэ нь маш том ДНХ-ийн фрагментийг агуулдаг.
Бүх инженерчилсэн векторууд нь хуулбарлах (хувилагч) гарал үүсэлтэй, клонжуулсан сайт (гадны ДНХ-г хуулбарлах, чухал тэмдэглэгээг тасалдуулаагүй), сонгох боломжтой тэмдэглэгээ (голдуу антибиотикт тэсвэртэй ген байдаг.)