Фосфат буферийг хэрхэн яаж хийх вэ?

Эдгээр буферуудыг төвийг сахисан рН-ийн ойролцоо биологийн хэрэглээнд ашиглаж болно

Фосфатын буфер юу үүсгэдэг вэ? Нэгдүгээрт, энэ нь гурван хүчиллэг протон агуулдаг учир фосфорын хүчил олон тооны диссоциацийн тогтмол байдаг бөгөөд гурван рН-ийн аль алинд нь буфер үүсгэхэд ашиглаж болно.

Фосфорын хүчил (ХХЗХ-ны Химийн физик, физикийн гарын авлагаас) нь гурван пКа утга нь 2.16, 7.21, 12.32 байна. Моносаза фосфат ба түүний коньюгат суурийн бааз, даоса фосфатыг ихэвчлэн 7-р рН-ийн буфер үүсгэдэг.

Энэ буфферийг TAE ба TBE буфферуудыг хийхээс арай хэцүү байдаг. Гэхдээ энэ нь тийм ч хэцүү биш юм. Зүгээр л дундаж. Энэ буферийг буулгахад 10 орчим минут шаардагдана. Энд яах вэ.

1. Орчны орчны талаар шийдвэр гаргана

Буфер үүсгэхийн өмнө эхлээд хүссэн молибдений хэмжээ ямар байхыг мэдэх хэрэгтэй. Ихэнх буферууд 0.1 М ба 10 М-ийн концентрацид хамгийн сайн ажилладаг. РН-ийн хүчил / коньюгат суурь pKa-ийн 1 pH нэгж дотор байх ёстой. Энгийн хувьд энэ түүвэрлэлтийн тооцоо нь 1 литр буферийн хувьд байх болно.

2. Хүчиллэгийг үндсэнд нь харьцуулах

Хандерсон-Хаселбалчын тэгшитгэл (доорх) ашиглан хүчилд харьцах харьцаа ямар байхыг хүссэн рН-ийн буфер үүсгэх шаардлагатай. Таны хүссэн рН-ийн ойролцоох pKa утгыг ашиглана. Энэ харьцаа нь pKa-тай тохирох хүчиллэг суурь коньюгат хос холбоонд хамаарна.

HH Тэгшитгэл: pH = pKa + log ([Суурь] / [Хүчил])

РН 6.9, [Base] / [Acid] = 0.4898 буферийн хувьд

[Хүчил] орлуулах ба [Суурь]

Буферийн хүчилтөрөгчийн хэмжээ нь [Хүчлийн] + [Үндсэн] нийлбэр юм.

1 М буфер [Base] + [Acid] = 1 болон [Base] = 1 - [Acid]

Тэгшитгэлийн тэгшитгэлийг 2-р алхамаас эхлэн дараах байдлаар авч болно:

[Хүчил] = 0.6712 моль / л

[Хүчил]

Тэгшитгэлийг ашиглан: [Үндсэн] = 1 - [Хүчиллэг], та үүнийг тооцоолж болно:

[Үндсэн] = 0.3288 моль / л

3. Хүчлийн ба коньюгат баазыг холино

Хандерсон-Хассбалбалийн тэгшитгэлийг ашиглан таны буферын хүчилд харьцах харьцаа ямар байхыг тооцоолсны дараа 1 литр уусмалаас бага хэмжээний моносазат фосфат, натрийн фосфат ашиглан бэлтгэнэ.

4. рН-ийг шалгах

Бохирдуулагчийн рН-ийн зөв рН-ийг баталгаажуулахын тулд рН-ийн шалгалтыг ашиглана. Фосфорын хүчил, натрийн гидроксид (NaOH) ашиглан бага зэрэг тохируулна.

5. Эзлэхүүнийг засах

Хүссэн рН-ийн утгыг авсны дараа буферийн эзэлхүүнийг 1 литрт хийнэ. Дараа нь хүссэний дагуу буферийг шингэлнэ. Энэ буфер нь 0.5 М, 0.1 М, 0.05 М-ийн буфер үүсгэхийн тулд шингэрүүлж болно.

6. Буферийн зөвлөмжүүд

PKa нь нарийн хэмжигдэхүүнээр амархан хэмжигддэггүй гэдгийг санаарай. Өөр өөр эх сурвалжаас авсан ном хэвлэлд өөр өөр утгатай байж болно.

7. Та юу хэрэгтэй вэ

Буферийг хийхийн тулд гурван зүйл хэрэгтэй болно. Үлдсэн материал нь тоног төхөөрөмж юм. Эдгээр бодисууд нь рН-ийг тохируулах моносазосфосфат, натрийн фосфат, фосфорын хүчил, натрийн гидроксид юм.

Та бас рН метр, шалгаж, зохих лабораторид хэрэгтэй болно. Үүнд багтаамжтай колбо, цилиндр, цилиндр, хутгуур зэргийг багтаана.

Эцэст нь та хутгах зуух хэрэгтэй.